磷钨酸负染色

磷钨酸负染色又称磷钨酸阴性染色,是相对于普通染色(称正染色)而言的。负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术,用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。染色后,在电镜下观察时,被观察的对象为亮的,背景为暗的。

磷钨酸负染色首先由Hall在1955年提出,Hall在病毒研究中用磷钨酸染色后,发现图像的背景很暗,而病毒象一个亮晶的"空洞"被清楚地显示出来。在超薄切片的染色中,染色后的样品电子密度因染色而被加强,在图像中呈现黑色。

乳滴用磷钨酸负染图磷钨酸负染色电镜图

磷钨酸负染色液

磷钨酸负染色液是一种生物染色液,有多种不同规格,包括磷钨酸负染色液(2%)、磷钨酸负染色液(3%)和磷钨酸负染色液(5%)等。

磷钨酸负染原理

磷钨酸负染原理是用重金属盐——磷钨酸对铺展在载网上的样品进行染色;吸去染料,样品干燥后,样品凹陷处铺了一薄层重金属盐,而凸的出地方则没有染料沉积,从而出现负染效果。

磷钨酸负染液配制

磷钨酸负染液的配制通常以钨酸钠和磷酸为原料制得,并且要加酸化剂氢氯酸HCl,用双蒸水或磷酸缓冲液配制成1%~3%的溶液,使用时应用1mol/L氢氧化钠溶液将磷钨酸负染色液的pH值调至6.4~7.0或实验所需的值。

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